濕熱滅菌的原理是使微生物的蛋白質(zhì)和核算變性導致微生物死亡。

濕熱滅菌分為過度殺滅法和殘存概率法。

? 過度殺滅法：被滅菌物品獲得F0值至少為12分鐘的滅菌程序。

注意這個定義里面包含一個假設條件，即物品初始含菌量小于等于1000000，并且微生物D值小于等于1。這就是GMP附錄1第五十八條要求制藥企業(yè)監(jiān)測滅菌前產(chǎn)品生物負荷的原因。

歐盟對過度殺滅法的定義是：121攝氏度下濕熱滅菌15分鐘。

??殘存概率法：不耐熱物品考慮使用殘存概率法滅菌程序，需研究物品生物負荷和耐熱性來設計滅菌程序，保證PNSU小于0.000001。

PNSU（probability of non-sterile unit），翻譯為非無菌單元概率。

注意這個定義是概率，而不是數(shù)值。千萬不能簡單的理解成提供一百萬瓶無菌制劑可以允許一瓶染菌。否則你會死的很慘。

濕熱滅菌的理論基礎：單位時間內(nèi)被殺滅的微生物數(shù)正比于t0時原有的數(shù)目。

D值：在一定溫度下將微生物滅菌90%（即下降一個對數(shù)單位）所需的時間。

D值表示時間，單位一般用min。

D值是微生物的耐熱參數(shù)，不同的微生物的D值不同。

D值越大，微生物越耐熱。

相同微生物在不同溫度下的D值不同。

相同微生物在不同溶液中、不同溫度下的D值也不同。

從下圖可以看出，溫度越高，直線越陡，下降一個對數(shù)單位所需時間越短，即D值越小。

Z值：滅菌溫度系數(shù)，系指使某一種微生物的D值變化一個對數(shù)單位，滅菌溫度應升高或下降的度數(shù)。

Z值表示溫度變化，單位一般用攝氏度。

Z值越大，微生物對溫度變化的敏感性越弱。

Z值的作用是轉(zhuǎn)換計算不同溫度下的殺滅微生物的效果。

Z值可以通過耐熱性曲線法實驗數(shù)據(jù)計算得到，Z值是耐熱性曲線斜率的負倒數(shù)。

F0值：Z值10℃時，一定滅菌溫度（T）產(chǎn)生的滅菌效果與121℃產(chǎn)生的滅菌效力相同時所相當?shù)臅r間。

F0值表示時間，單位一般用min。

干熱滅菌的原理是利用高溫使微生物的脫氧核糖核酸等高分子產(chǎn)生非特異性氧化而殺滅的方法。

干熱滅菌并不嚴格服從對數(shù)下降規(guī)則。

用于計算Fh值的Z值通常取20攝氏度（PDA TR3,2013）

用于計算除熱源工藝的Z值通常不低于46.4攝氏度（PDA TR3,2013）

討論

? 115攝氏度滅菌30分鐘的滅菌工藝算不算最終滅菌？

這個問題的答案對于老板很關鍵，涉及到潔凈廠房設計成B+A還是C+A，兩者潔凈工程建造成本和日常運行成本都差距很大。你替老板省錢，你就有錢途。

滅菌段 F0 = 0.251×30 = 7.53

積分累加上升溫段和降溫段F0達到11.4

115攝氏度滅菌30分鐘，實際滅菌溫度會略高于115，最后滅菌F0值可能會大于12min。這與滅菌柜的性能有關。

筆者認為從科學的角度來講，升溫段和降溫段的F0值貢獻不置可否，所以115攝氏度滅菌30分鐘的滅菌屬于最終滅菌。

滅菌決策樹

無菌產(chǎn)品開發(fā)可能會用到滅菌方法選擇決策樹，下面兩張圖摘選自《藥品GMP指南2010版》。

滅菌時間計算

不同滅菌溫度的選擇對應不同的滅菌時間，用對數(shù)函數(shù)公式手工計算非常麻煩，群友shark設計了Excel表格，填寫滅菌溫度后自動計算出最小滅菌時間。

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滅菌相關參考書

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致謝：感謝濤哥、美發(fā)的認真校稿。

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